为什么要使用细胞死活染料？

死细胞的非特异性地结合会增加假阳性。死细胞会产生自发荧光干扰特定信号的检测。 在分析目的细胞之前应该排除死细胞。

Multicolor Immunophenotyping with ViaKrome 405 Fixable Viability Dye

Multicolor Immunophenotyping without a viability stain

有/无死细胞排除处理的样本分析比较

复苏后的 PBMC 在免疫染色之前不添加（图 A）或者添加 ViaKrome 405 可固定活性染料（55℃，10分钟）（图 B）。然后，使用 Perfix-nc 细胞染色试剂盒（型号 B10825）处理细胞，并用 Granzyme B-FITC、CD19-PE、CD14-ECD、CD79a-PC5.5、CD3-PC7 和 CD45- Krome Orange 进行染色。

使用 CytoFLEX LX N-V-B-Y-R-R-I 系列流式细胞仪采集数据，并使用 Kaluza 分析软件进行分析。 数据统计信息显示：两个不同条件下，门内细胞在上一门级百分比也不一样，充分展示了消除死细胞以后的数据效果。