SPRISelect 片段筛选试剂盒性能和相关数据

下一代测序 (NGS) 是当今基因组学研究中最普遍的技术。不同的应用有不同的建库需求,需要灵活的解决方案。而 DNA 片段的大小会直接影响测序数据的有效性。SPRISelect 试剂盒旨在让操作人员自由选择需要筛选的片段范围。该试剂采用经过成熟、业界领先的固相可逆固定 (SPRI) 技术,提供稳定的、可重复的和可定制的片段筛选功能。

  • 可调 150 到 800 bp 片段筛选范围,便于调整用于特定应用和测序仪的片段
  • 高效的磁珠技术消除了对凝胶、芯片或特殊仪器的需求
  • 从手动到自动化,可在 96 孔板中进行高通量处理

 

双侧片段筛选功能

左侧片段筛选可移除小于目标片段的 DNA,而右侧片段筛选将移除大于目标片段的 DNA。通过利用左侧和右侧片段筛选,您可以获得更小范围的 DNA 片段。

SPRISelect-left size selctionSPRISelect-right size selection

 

SPRISelect-overlay of left and right size selectionsSPRISelect-double size selection

 

SPRISelect-overlay of left and right size selections

 

使用 SPRISelect 试剂盒对大肠杆菌片段化的 gDNA 进行双侧筛选。[图 A] 通过一定比例左侧筛选获得主峰为 400bp 的片段。[图B] 通过一定比例右侧选择获得主峰为 200bp 的片段。[图C] 左侧筛选(红色)和右侧筛选(蓝色)的叠加。[图 D] 双侧筛选去除大于和小于目标的片段,并捕获 200bp-400bp 的目标片段范围。对于所有 DNA 片段测量使用 Agilent 2100 生物分析仪高灵敏度芯片(Agilent)。峰 35 和 10300 是内标。

 

可重复和可调性

SPRISelect 试剂是按照严格的规格要求生产的,可确保每次运行和批次间的可重复性。

使用 SPRISelect 对大肠杆菌片段化的 gDNA 进行了两种不同的片段筛选。每个片段选择执行三次。三个平行样品都显示出非常一致的片段筛选能力。(左)0.5X 左侧片段筛选(右)0.5X 右侧片段筛选。DNA 片段是使用安捷伦 2100 生物分析仪高灵敏度芯片(安捷伦)测量的。峰 43 和 115 是内标。

SPRISelect-Size selection ration of 0.5xSPRISelect-E coli size selection-ratio 0.5x

 

(左)0.5X 左侧片段筛选。(右)0.5X 右侧片段筛选。

 

更少的手动操作时间

使用 SPRISelect 试剂盒和另外两个市售试剂盒对大肠杆菌片段化的 gDNA 进行片段筛选对比。(左)该图表示单侧片段筛选或纯化时间。单侧筛选的 SPRISelect 工作流分别比供应商 A 和供应商 B 快 4.2 倍和 2 倍。(右)该图表示双侧片段筛选的时间。用于双侧筛选的 SPRISelect 工作流分别比供应商 A 和供应商 B的同类产品快 3.8 和 2 倍。SPRISelect 在所有三个供应商同类产品中所耗处理时间最少,至少为 50%。这个时间基于手动操作 8 个样本的片段筛选所获得。

Genomics SPRISelect Cleanup Time Genomics SPRISelect Size Selection Time

 

 


 

SPRIselect Left 工作流程

选择比目标更大的 DNA 片段

Genomics SPRIselect Left Side Size Selection Workflow

  1. 将 DNA 与磁珠结合
  2. 将磁珠与杂质分离
  3. 用 85% 乙醇清洗磁珠,去除杂质
  4. 将 DNA 从磁珠上洗脱
  5. 转移到存储板

 

SPRIselect Right 工作流程

Selecting for DNA smaller than a target size or selecting for DNA within a target region.

选择比目标更小的 DNA 片段或在目标领域选择 DNA 

Genomics SPRIselect Right Side Size Selection Workflow

  1. DNA 与磁珠结合
  2. 将上清液转移到新板
  3. 将 DNA 与磁珠结合
  4. 将磁珠与杂质分离
  5. 用 85% 乙醇清洗磁珠,去除杂质
  6. 将 DNA 从磁珠上洗脱下来
  7. 转移到存储板

 

兼容手动或自动化运行

使用 SPRISelect 对 8、24、48 和 96 个 DNA 样本执行双侧筛选所需的估计手动操作时间和总时间(以分钟为单位)。可以在 Biomek 工作站上手动或自动化执行不同的方法操作。该表表示在 Biomek i7 hybird 工作站上执行的自动化时间。显示手动和自动化之间的时间差异。NR = 不推荐。

SPRISelect Manual Automated
Batch Size 8 Hands-on Time 10 10
Total Time 20 40
24 Hands-on Time 15 10
Total Time 25 42
48 Hands-on Time NR 15
Total Time NR 51
96 Hands-on Time NR 15
Total Time NR 60

 

用于片段筛选的产品

PART # NAME PREPS
B23317 SPRISelect Reagent 5 mL
B23318 SPRISelect Reagent 60 mL
B23319 SPRISelect Reagent 450 mL

 

 

未用于或验证用于疾病或其他情况的诊断。

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