SPRISelect 片段筛选试剂盒性能和相关数据
下一代测序 (NGS) 是当今基因组学研究中最普遍的技术。不同的应用有不同的建库需求,需要灵活的解决方案。而 DNA 片段的大小会直接影响测序数据的有效性。SPRISelect 试剂盒旨在让操作人员自由选择需要筛选的片段范围。该试剂采用经过成熟、业界领先的固相可逆固定 (SPRI) 技术,提供稳定的、可重复的和可定制的片段筛选功能。
- 可调 150 到 800 bp 片段筛选范围,便于调整用于特定应用和测序仪的片段
- 高效的磁珠技术消除了对凝胶、芯片或特殊仪器的需求
- 从手动到自动化,可在 96 孔板中进行高通量处理
双侧片段筛选功能
左侧片段筛选可移除小于目标片段的 DNA,而右侧片段筛选将移除大于目标片段的 DNA。通过利用左侧和右侧片段筛选,您可以获得更小范围的 DNA 片段。
使用 SPRISelect 试剂盒对大肠杆菌片段化的 gDNA 进行双侧筛选。[图 A] 通过一定比例左侧筛选获得主峰为 400bp 的片段。[图B] 通过一定比例右侧选择获得主峰为 200bp 的片段。[图C] 左侧筛选(红色)和右侧筛选(蓝色)的叠加。[图 D] 双侧筛选去除大于和小于目标的片段,并捕获 200bp-400bp 的目标片段范围。对于所有 DNA 片段测量使用 Agilent 2100 生物分析仪高灵敏度芯片(Agilent)。峰 35 和 10300 是内标。
可重复和可调性
SPRISelect 试剂是按照严格的规格要求生产的,可确保每次运行和批次间的可重复性。
使用 SPRISelect 对大肠杆菌片段化的 gDNA 进行了两种不同的片段筛选。每个片段选择执行三次。三个平行样品都显示出非常一致的片段筛选能力。(左)0.5X 左侧片段筛选(右)0.5X 右侧片段筛选。DNA 片段是使用安捷伦 2100 生物分析仪高灵敏度芯片(安捷伦)测量的。峰 43 和 115 是内标。
(左)0.5X 左侧片段筛选。(右)0.5X 右侧片段筛选。
更少的手动操作时间
使用 SPRISelect 试剂盒和另外两个市售试剂盒对大肠杆菌片段化的 gDNA 进行片段筛选对比。(左)该图表示单侧片段筛选或纯化时间。单侧筛选的 SPRISelect 工作流分别比供应商 A 和供应商 B 快 4.2 倍和 2 倍。(右)该图表示双侧片段筛选的时间。用于双侧筛选的 SPRISelect 工作流分别比供应商 A 和供应商 B的同类产品快 3.8 和 2 倍。SPRISelect 在所有三个供应商同类产品中所耗处理时间最少,至少为 50%。这个时间基于手动操作 8 个样本的片段筛选所获得。
SPRIselect Left 工作流程
选择比目标更大的 DNA 片段
- 将 DNA 与磁珠结合
- 将磁珠与杂质分离
- 用 85% 乙醇清洗磁珠,去除杂质
- 将 DNA 从磁珠上洗脱
- 转移到存储板
SPRIselect Right 工作流程
Selecting for DNA smaller than a target size or selecting for DNA within a target region.
选择比目标更小的 DNA 片段或在目标领域选择 DNA
- DNA 与磁珠结合
- 将上清液转移到新板
- 将 DNA 与磁珠结合
- 将磁珠与杂质分离
- 用 85% 乙醇清洗磁珠,去除杂质
- 将 DNA 从磁珠上洗脱下来
- 转移到存储板
兼容手动或自动化运行
使用 SPRISelect 对 8、24、48 和 96 个 DNA 样本执行双侧筛选所需的估计手动操作时间和总时间(以分钟为单位)。可以在 Biomek 工作站上手动或自动化执行不同的方法操作。该表表示在 Biomek i7 hybird 工作站上执行的自动化时间。显示手动和自动化之间的时间差异。NR = 不推荐。
SPRISelect | Manual | Automated | ||
---|---|---|---|---|
Batch Size | 8 | Hands-on Time | 10 | 10 |
Total Time | 20 | 40 | ||
24 | Hands-on Time | 15 | 10 | |
Total Time | 25 | 42 | ||
48 | Hands-on Time | NR | 15 | |
Total Time | NR | 51 | ||
96 | Hands-on Time | NR | 15 | |
Total Time | NR | 60 |
用于片段筛选的产品
PART # | NAME | PREPS |
---|---|---|
B23317 | SPRISelect Reagent | 5 mL |
B23318 | SPRISelect Reagent | 60 mL |
B23319 | SPRISelect Reagent | 450 mL |
未用于或验证用于疾病或其他情况的诊断。
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