RNAdvance Tissue Performance and Data

从组织中提取总 RNA

RNAdvance Tissue 试剂盒是基于 SPRI 顺磁珠技术的核糖核酸 （RNA） 提取试剂。它能够从各种组织中提取总 RNA，而不受有机溶剂的危害以及废物清除问题的影响，也不涉及真空过滤和离心程序等既耗时又耗力的操作步骤。可以使用 2 mL 管或 96 孔板手动操作，或在贝克曼库尔特 Biomek 液体处理工作站进行 96 孔板自动化操作。通过以下数据得出，该提取过程产生的总 RNA 回收率高于传统的柱提法的试剂盒。

  • 与基于 PCR 的下游应用兼容
  • 从多种组织类型中提取并纯化高质量 RNA
  • 有效去除基因组 DNA 和其他污染物

在不牺牲纯度的情况下，从多种组织类型中高回收 RNA

Genomics RNAdvance Tissue Total RNA Yield Genomics RNAdvance Tissue Total RNA Purity 使用 RNAdvance Tissue 试剂盒和其他市售竞争试剂盒从 10mg 的大脑、肝脏、肺、肾脏或尾组织切片中提取 RNA。在图1（上图）中，使用NanoDrop（Thermo Fisher Scientific）进行对 RNA 定量。采用 RNAdvance Tissue 试剂盒从五种不同组织类型中回收的 RNA 量高于其他市售竞争试剂盒在相同条件下的 RNA 提取产量。在图2（上图）中，使用 NanoDrop（Thermo Fisher Scientific）评估样品的纯度。对于所有组织类型，RNAdvance Tissue 试剂盒以 A260/280 的比值满足需求。 

 

卓越的 RNA 提取质量

使用 RNAdvance Tissue 试剂盒从 10mg 脑组织中提取 RNA，并通过 Agilent 2100 生物分析仪Eukaryote Total RNA Nano chip 分析。在下图 3 和图 4 中，显示了从脑组织中提取的两种 RNA 峰图。RIN 值大于 9，表明已回收高质量且完整的 RNA。

Genomics RNAdvance Tissue RIN Score Figure 3 Genomics RNAdvance Tissue RIN Score Figure 4

 

RNAdvance Tissue 试剂盒可提供适用于下游 PCR 应用的 RNA

通过 qPCR 评估扩增 DNA 的能力。采用引物（正向引物 5’-ggacttcgagatag-3’ 和反向引物 5’-agcactgttgcgtacag-3’）扩增 (β)-actin 基因（ActB）的第 4 个和第 5 个外显子，产生 327bp 扩增子。在图5（下图）中，无 RT 对照还表明了可干扰下游 RNA 应用的 DNA 去除。在图 6（下图）中，使用 RNAdvance Tissue 试剂盒提取的 RNA 可扩增，表明该试剂盒去除了 PCR 抑制剂。这些结果表明所提取的 RNA 可用于在下游 PCR 应用。

Genomics RNAdvance Tissue RIN Score Figure 5 Genomics RNAdvance Tissue RIN Score Figure 6

与柱提法的竞争试剂盒相比，采用 Genomics RNAdvance Tissue 试剂盒可在更少的移液操作下用更短的时间从样品中提取 RNA

图 7（下图）表示使用 RNAdvance Tissue 试剂盒或柱提法的竞争试剂盒提取 1 至 96 个样本的 RNA 的总耗时。从 20 个样本的组织内提取 RNA，较之于相同条件下其他同类竞争试剂盒，采用 RNAdvance Tissue 试剂盒总耗时更短。在图 8（下图）中，在处理 1、8、24、48 和 96 个样本时操作移液器操作的总次数（包括加样、混样和丢弃吸头等）。与柱提法的竞争试剂盒相比，在处理 8 个样本以上的情况时，采用多通道移液器涉及的移液器操作明显较少。

Genomics RNAdvance Tissue Total Time Figure 7 Genomics RNAdvance Tissue Pipette Actions Figure 8

RNAdvance Tissue 试剂盒工作流程视图

Genomics RNAdvance Tissue Workflow 

     

     

     

     

     

    1. 在裂解缓冲液和蛋白酶 K 中裂解组织

    2. 将 RNA 与磁珠结合

    3. 将磁珠与杂质分离

    4. 用洗涤缓冲液和 70% 乙醇清洗磁珠，去除杂质

    5. 使用 DNase I 处理样品

    6. 用洗涤缓冲液将 RNA 重新结合到磁珠中

    7. 用 70% 乙醇清洗磁珠，去除杂质

    8. 从磁珠中洗脱 RNA

    9. 转移到新的孔板

     

    根据批次大小或整体实验通量所涉及的手动操作或自动化方法的应用

    采用 RNAdvance Tissue 试剂盒进行 8、24 和 96 个样本的组织 RNA 提取所需的预估动手耗时和总耗时（以小时计数）。该提取工作可在液体处理系统上手动或自动执行。自动化的耗时是 Biomek i5 多通道 96 基因组工作站上执行时间。显示手动和自动化之间的耗时差异（NR 指“不推荐”）。

    RNAdvance Tissue Manual Automated
    Batch Size 8 Hands-on-Time 0.08 0.25
    Total Time 1.00 2.50
    24 Hands-on-Time 0.11 0.25
    Total Time 1.10 2.50
    96 No DNase Treatment Hands-on-Time NR 0.25
    Total Time NR 2.00
    96 Hands-on-Time NR 0.25
    Total Time NR 2.50

     

    用于从组织中提取 RNA 的 RNAdvance Tissue 试剂产品

    RNAdvance Tissue 系列试剂盒根据您的实验通量需求提供三种规格。点击下方任意一个产品货号进行购买或询价。想要了解更多信息，请浏览我们关于 RNAdvance Tissue 试剂盒用于组织 RNA 提取的相关网页。

    PART # NAME PREPS
    A32645 RNAdvance Tissue Kit  50
    A32649 RNAdvance Tissue Kit  96
    A32646 RNAdvance Tissue Kit  384

     

     

    * 未用于或验证用于疾病或其他条件的诊断
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