Viral RNA Extraction Performance Data

RNAdvance Viral 与 RNAdvance Viral XP

RNAdvance Viral 试剂盒是基于 SPRI 顺磁珠技术构建的核糖核酸（RNA）分离化学试剂。经证实，SPRI 技术提取高纯度的 RNA，可用于高达 200µL 的唾液或拭子转运介质。该技术可在单个试管中或 96 孔板上进行，并可灵活地在各种液体处理平台上实现自动化操作。提取病毒 RNA 首先从各种样本中溶解病毒衣壳，包括唾液样本及鼻咽或口咽拭子样本。溶解后，磁珠捕获 RNA；然后进行洗涤，将包括扩增抑制剂在内的污染物冲洗干净。

产生适用于下游基因表达分析技术（如 qRT-PCR 与 NGS）的高质量 RNA
灵活的 SPRI 技术适用于液体处理设备处理大量样本。
检测限 (LoD) 显示为 1 拷贝数/μL

RNAdvance Viral 从唾液样本及鼻咽或口咽拭子样本进行提取的性能 - 分析性能

RNAdvance Viral 性能数据表 1

表 1. 从加有 1 和 2 拷贝数/µL 浓度 Exact Diagnostics SARS-CoV-2 标准品的转运介质中提取 RNA ，并一式四份运行。通过 qRT-PCR 评估 N1、N2 和 N3 基因的 Ct 值。含有 1 拷贝数/μL 和 2 拷贝数/μL 标准品的样本 Ct 值相当，且其 LoD 经确定为 1 拷贝数/μL。

RNAdvance Viral 性能数据图 1

图 1 从 5 个唾液样本和 5 个加有 1 拷贝数/μL SARS-CoV-2 分离株的 Healthlink UTM 收集管中提取 RNA，一式三份。通过 qRT-PCR 评估 N1、N2 和 RP（未显示）基因的 Ct 值。与 UTM 样本相比，唾液样本的平均 Ct 值较低（1～2），变异性较小，N1 和 N2 的 SD 值分别为 0.85 和 1.78。

转运介质样本的 RNAdvance Viral XP Extraction - 分析性能

RNAdvance Viral 性能数据表 2

*因无法测出，故平均 Ct 值未算出。
表 2. 从 SeraCare 阳性对照品（AccuPlex™ SARS-CoV-2 参比品试剂盒）中提取浓度为 0.3、1 和 3 拷贝数/μL 的 RNA，一式三份使用 RT-PCR 进行扩增。所有浓度高于 1 拷贝数/μL 的预设阳性样本均呈阳性，证实 LoD 为 1 拷贝数/μL。

RNAdvance Viral 试剂盒为下游 RT-PCR 工作流程提供稳定的工作性能。

RNAdvance Viral 性能数据图 2

图 2 （如左）使用 RNAdvance Viral XP 和 Competitor Column Based 提取试剂盒从 3 个已知阳性和 3 个已知阴性的 SARS-CoV-2 样本中提取 RNA。将 N1、N2 和 RP 基因的 RT-PCR Ct 值取平均值。误差条代表样本 Ct 值的标准差。（如右）使用 RNAdvance Viral 或竞品磁珠试剂盒手动提取 RNA。使用 SARS-CoV-2 N1、N2、N3 和 RP 基因的靶向引物集，通过 qRT-PCR 测定 Ct 值，结果显示其 Ct 值相当。在 0.2 拷贝数/μL时，两试剂盒均显示 Ct 值未确定，表明 LoD 为 0.2-2 拷贝数/μL。

RNAdvance Viral 可视化工作流程

RNAdvance Viral 工作流程性能数据

LBF 和蛋白激酶 K 中的溶解组织
将 RNA 与磁珠结合
将磁珠与污染物分离
使用 WBE 清洗磁珠
使用 70% EtOH 清洗磁珠
从磁珠中洗脱 RNA
转移至另一个细胞培养板上

中位组织培养感染剂量 (TCID50) 研究证实溶解 (LBF) SARS-CoV-2 失活。

将 SARS-CoV-2 病毒与 LBF 混合，在室温下培养 20 分钟、60 分钟或 60oC 下培养 20 分钟。病毒-LBF 混合物经过过滤和离心，用 PBS 置换 LBF，以避免细胞毒性反应。将该混合物稀释 10 倍后接种细胞。表 3 中对 TCID50/mL 进行了计算，结果说明 LBF 可有效灭活 SARS-CoV-2 病毒。

RNAdvance Viral 性能数据表 3