AUC数据如何帮助研究人员提高AAV产量?
前言: 目前AAV产量最高单批次可达到1013VG/L。本文主要介绍Joshi等人的研究,该研究采用“fedbatch”工艺,即在生长培养基中持续添加营养物质,将病毒载体生产效率提升20倍。同时,使用AUC(分析型超速离心机)分析数据来评估不同生长条件下病毒衣壳的空/满比率和包装效率{参考文献}。
利用AUC数据进行QC分析
生物反应器fedbatch培养提高产量
采用fedbatch培养技术在细胞培养基中添加营养物质,既能增加最大细胞密度,又能增大每个细胞产生的病毒基因组拷贝数。此外,对AUC数据进行分析,可确定基因组的包装效率(满载衣壳和空衣壳的比率),比较传统方法和fedbatch培养方法的病毒产量。
AUC数据用于分析病毒包装效率
AUC沉降速率是一种用于评估满/空心病毒颗粒比率的行业标准技术。对标准/低密度生物反应器(图1)和高密度/ fedbatch培养生物反应器(图2)中的生物活性颗粒AUC数据进行比较,结果表明,两者装载病毒生物活性颗粒的比例相同。
AUC数据分析有助于优化fedbatch培养
优化生长条件以获得最高病毒产量,对于具有商业可行性的基因疗法至关重要。高密度fedbatch培养作为一种优化策略,可检测病毒颗粒的包装效率和基因组完整性。AUC数据分析则是评估AAV衣壳包装效率的有效工具。
小结
本研究案例表明AUC在优化细胞生长条件以获得最大病毒载体生产效率方面的重要性。
参考文献:Joshi et. al. Mol Ther. Methods Clin Dev. 2019 Feb 16;13:279-289
产品仅用于科研,不用于临床诊断。