GenFind V3 Performance and Data
从血液和血清中分离的基因组 DNA
GenFind V3 试剂盒是一款基于 SPRI 顺磁磁珠技术的基因组 DNA(gDNA)提取试剂盒。可从含抗凝剂(如 EDTA、枸橼酸盐或肝素)的新鲜或冷冻血液中提取得到可用于 PCR 的 gDNA。该方法既适用于 2mL 离心管或 96 孔板进行手工操作,也适用于贝克曼库尔特 Biomek 移液工作站进行自动化操作。相较于其他供应商的血液 gDNA 提取试剂盒产品, GenFind V3 试剂盒具有始终如一的提取性能。
- 所提取 gDNA 具有高质量和高纯度
- 无任何抗凝剂残留,对 PCR 和其他下游反应无抑制
- 处理高达 400µL 的新鲜或冷冻血液
gDNA 竞争性的回收率和纯度
使用 GenFind V3 试剂盒和其他供应商的试剂盒从 200 µL 新鲜或冷冻血样中提取 gDNA,血样分别含有肝素、EDTA 和枸橼酸盐抗凝剂。(图1) 使用 Quant-iT DNA 检测试剂盒、Picogreen 和NanoDrop(Thermo Fisher Scientific)对 gDNA 产量进行定量分析。在含有 EDTA 的样本中,GenFind V3 试剂盒提取 gDNA 产量高于其他供应商试剂盒,在含有肝素和枸橼酸盐的样本中 GenFind V3 试剂盒提取 gDNA 的产量也具有竞争优势。(图2)使用 NanoDrop(Thermo Fisher Scientific)测定样品纯度。无论是新鲜还是冷冻血样,GenFind V3 试剂盒所提取的 gDNA 均具有理想的A260/280 比值。
采用 GenFind V3试剂盒提取高纯度的 gDNA
使用 GenFind V3 试剂盒、GenFind V2 试剂盒和三种其他供应商的试剂盒从 200 µL 新鲜或冷冻血液中提取 gDNA,所用血液分别含有抗凝剂肝素、EDTA 和枸橼酸盐。使用 NanoDrop(Thermo Fisher Scientific)测定 gDNA 纯度。无论在何种抗凝剂存在条件下,GenFind V3 试剂盒所提取 gDNA 的纯度均高于 GenFind V2 试剂盒和其他供应商的试剂盒。产量随血液用量增大而提高
增加血样用量可以提高总产量且不影响纯度。使用 GenFind V3 从 400 µL 新鲜血液中提取 gDNA,所用血液含有抗凝剂 EDTA。使用 NanoDrop(Thermo Fisher Scientific)测定 gDNA 纯度和产量。
无 PCR 和下游应用抑制剂残留
通过 qPCR 进行 PCR 能力评价,该引物组(正向引物 5´-ggacttcgagcaagagatgg-3´ 和反向引物 5´-agcactgtgttggcgtacag-3´)扩增片段为跨越 β-肌动蛋白基因(ActB)的第 4 个和第 5 个外显子,片段大小为 327bp。(左图)从含有抗凝剂枸橼酸盐、EDTA 或肝素的血样中提取的 10ng gDNA 扩增曲线图;所有提取 gDNA 产物均可以进行 DNA 扩增,表明未残留任何抗凝剂类的 PCR 抑制剂。(右图)使用 GenFind V3 试剂盒和 GenFind V2 试剂盒从含有枸橼酸盐的血样中提取的 10ng gDNA 扩增曲线图。
对高分子量 DNA 具有高提取效率
GenFind V3 试剂盒提取高质量 gDNA。从含肝素、EDTA 和枸橼酸盐的血样中提取的 gDNA,在 Agilent Genomic DNA ScreenTape 上进行质量分析。(左图)GenFind V3 提取的所有 gDNA 其 DIN 值均 ≥ 9.0,表明提取的 gDNA 质量高且完整性好。使用供应商 A 试剂盒提取 gDNA 质量偏低,DIN 值为7.8。(右图)从含肝素和枸橼酸盐的血样中提取的 gDNA 样品峰图。
工作流程视图
1. 使用裂解液和蛋白酶 K 裂解全血或血清
2. 将 DNA 与磁珠结合
3. 将磁珠与杂质分离
4. 使用清洗缓冲液 1 清洗磁珠,以去除杂质
5. 使用清洗缓冲液 2 清洗磁珠,以去除杂质
6. 将 DNA 从磁珠上洗脱下来
7. 转移到新板存放
更少的移液器操作,减少手动操作时间
图 11 表示使用 GenFind V3 试剂盒或基于列操作的供应商 1 到 96 个样本提取 gDNA 的时间。GenFind V3 试剂盒可实现更短的手动操作时间完成 DNA 提取,即使在 10 个样本的情况下。在图 12 显示 1、8、24、48 和 96 个样本所需的移液操作总数。移液器操作包括加入样品、混合样品和丢弃上清液。使用多通道移液器,与基于列的供应商相比,在 24 个或更多样品情况下需要执行的移液器操作更少。
从血液中分离DNA的试剂盒
GenFind V3 试剂盒可根据您的实验通量需求提供 2 种试剂盒规格。请联系您当地的销售代表或访问我们的产品页面,请求报价。
PART # | NAME | PREPS |
---|---|---|
C34880 | GenFind V3 | 50 |
C34881 | GenFind V3 | 384 |
未用于或验证用于疾病或其他情况的诊断。
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