CosMCPrep Performance and Data

高低拷贝数质粒纯化

CosMCPrep 是一种基于固相可逆固定 (SPRI) 顺磁微珠技术的多功能质粒纯化试剂盒。CosMCPrep 可以用于纯化各种高拷贝数和低拷贝数模板,同时维持灵活性以支持手动和自动处理。

  • 提取高质量质粒
  • 实现纯化所有模板类型
  • 自动化方法保证稳定的质粒产量和质量

 

从大肠杆菌和绿脓杆菌中高回收高质量小质粒 DNA 和大质粒 DNA

Plasmid Type Concentration (ng/µl)  Yield (µg) 
High copy number small (<10kb) plasmid 359.2 14.4
High copy number small (<10kb) plasmid isolated from Pseudomonas  120.0 4.8
Naturally occurring large (>100kb) plasmid 90.3 3.6
Genomics CosMCPrep Performance Plasmid Purity

使用 CosMCPrep 试剂盒从两个大肠杆菌菌株中提取质粒;其中一个菌株携带高拷贝数小质粒(<10kb),另一个菌株携带天然的大质粒(>100kb),同时绿脓杆菌携带高拷贝数小质粒。使用 NanoDrop(Thermo Fisher)测定质粒 DNA 的浓度和产量。使用 NanoDrop(Thermo Fisher)评估质粒纯度。

在图 1(右图)中,所有质粒的 A260/280 和 A260/230 比率均符合下游应用的合格比率。*A260/280 的可接受比率为 1.8 -2.0,A260/230 的可接受比率为 2.0-2.2,但由于核苷酸比和 DNA 浓度不同,此比率可能更高(赛默飞科技 T042-技术公告)。

 

微量、小量或大量样品都使用相同的试剂盒

Volume of Overnight (mL)  Average Concentration (ng/µl)  Average Yield (µg)  Average A260/A280  Average A260/A230 
0.8 258 10.3 2.1 2.0
2 1893 74.0 2.2 2.8
5.5 2978 298.0 1.9 2.4

Genomics CosMCPrep Performance Volume Overnight从大肠杆菌中分离出高拷贝数小质粒(<10kb)。取过夜培养菌液,三个不同体积,裂解,使用 CosMCPrep 试剂盒分离质粒。投入量与质粒浓度成线性关系。

兼容质粒类型:

  • 低拷贝数质粒
  • 高拷贝数质粒
  • BACs
  • Cosmids
  • Fosmids
  • 天然大质粒

 

CosMCPrep 需要更少的动手操作时间

与使用柱提法的试剂盒相比,使用 CosMCPrep 试剂盒提取疟原虫DNA需要更少的动手时间和更少的移液步骤。图 3 表示使用 CosMCPrep 试剂盒或柱提法的试剂盒从样本中制备质粒的总时间。10 个样本时,使用 CosMCPrep 试剂盒可以更快地制备质粒。移液器操作的总数(图 4),是制备 1、8、24、48 和 96 个样本时动作,包括样品中的加样、混样和丢弃吸头等。使用多通道移液器时,与柱提法的试剂盒相比,需要执行的移液操作要少得多。

Genomics Genfind v2 DNA Yield Genomics Genfind v2 DNA Purity

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

工作流程视图

 Genomics CosMCPrep DNA Plasmid Purification 
  1. 收集细胞沉淀
  2. 使用 RE1 重悬细胞
  3. 使用 L2 裂解细胞
  4. 使用 N3 中和
  5. 离心和转移上清液
  6. 将质粒 DNA 与磁珠结合
  7. 将磁珠与杂质分离
  8. 用 70% 乙醇清洗磁珠,去除杂质
  9. 重复洗 3 次
  10. 从磁珠中洗脱质粒
  11. 转移到新的孔板

 

用于质粒纯化的 CosMCPrep 试剂盒

CosMCPrep 试剂盒根据您的实验通量需求提供两种试剂盒规格。单击下方的货号进行购买或询价。想要了解更多信息,请查看我们关于 CosMCPrep 试剂盒在 DNA 质粒纯化方面的应用。

PART # NAME PREPS
A37064 CosMCPrep  384
A29174 CosMCPrep  4000

 

 

* 未用于或验证用于疾病或其他条件的诊断。
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