专家答疑

德国莱比锡大学医学院临床免疫学研究所引进了一套贝克曼库尔特生命科学公司的DxFLEX 13色临床流式细胞术系统，这是欧洲第一套体外诊断（IVD）系统。本次网络研讨会， Ulrich Sack教授 , 将与您一起分享DxFLEX的入门使用经验，并为您展示该系统相对于传统系统的优势所在。DxFLEX采用雪崩光电二极管（APD）技术，所搭载的高灵敏度半导体电子器件能够把光信号转换成电信号，突破了基于光电倍增管（PMT）的传统流式细胞仪的性能局限。Sack教授指出，宽测量范围和直观数据处理效果，是快速轻松采用或改进新测量方法的基础。在此基础上，他认为引进该设备是一项成功的决策。

实验室引进DxFLEX后，是否可以继续沿用现有的panel设计还是需要创建新的panel？

可以继续沿用。引入DxFLEX时后，只需将现有FACSCanto II上的方案转移至DxFLEX即可继续使用。DxFLEX性能表现卓越，设门更简单。这可能也同样适用于Navios系列流式细胞仪的panel设计。

为了扩展panel设计，可采取以下3种策略：
1）替换现有panel中的抗体；2）在现有panel中增加其他抗体；3）确定BC panel（或Duraclone干粉试剂）并添加其他抗体。

可以。实验数据可通过CytExpert for DxFLEX软件中的统计菜单自动导出为. csv文件。

DxFLEX是否需要特定的LIMS连接接口？

不需要。DxFLEX可直接将结果传输至LIMS系统。首先将数据导出为. csv文件，然后使用中间件解决方案将该文件传输至LIMS系统。

或者，也可以使用Kaluza C软件分析CytExpert for DxFLEX导出的数据，然后将数据传输至LIMS。

相较于使用光电倍增管（PMT）的传统流式细胞仪，DxFLEX的灵敏度如何？

我们分别在FC500和DxFLEX流式细胞仪上使用DuraClone B27试剂盒进行临床比较研究，发现结果存在多处不一致。DxFLEX结果为阳性而FC500结果为阴性。之后，我们采用实验室开发检测方法（LDT）重新检测这些样品，证明这些样品的DxFLEX结果均为真阳性，表明本研究中DxFLEX灵敏度更高。

如果我购买最低配置的DxFLEX后需更多通道，可否支持后续对系统进行现场升级？

可以。贝克曼现场服务工程师可轻松对DxFLEX进行现场升级，只需更换USB加密狗解锁其他功能即可。

CytExpert for DxFLEX软件也属于体外诊断（IVD）类软件吗？

是的，CytExpert for DxFLEX软件属于DxFLEX IVD系统的一部分。

在质量控制跟踪方面，该仪器仅追踪微球还是也能够同时追踪内部过程控制？

目前该系统仅支持追踪DxFLEX Daily QC荧光微球。

DxFLEX是否支持96孔板移液系统？

支持孔板移液系统选项，可作为自动上样器的附加组件。

您能否更加详细地介绍一下APD技术？

点击观看DxFLEX的APD技术介绍视频：

如何应对溢出？这种情况在这项技术中常见吗？

无论采用何种技术，补偿溢出均不可避免，但不同于基于PMT的传统细胞仪，DxFLEX所采用的APD技术具有线性增益响应，补偿设置操作便捷，而且当增益设置改变时支持自动更新补偿库

您曾使用DxFLEX进行过MRD检测吗？该设备能否高速运行，快速高效地分析1~5x106个事件？

DxFLEX的事件处理速率高达30,000个事件/秒，因此适用于稀有细胞检测分析。另外，当15个通道全部开启采集细胞时，每个文件的事件限值超过25M，所以不会限制稀有细胞检测分析。

我们目前正在使用Navios Ex，如果使用DxFLEX，现有成熟panel设计是否需要大量改动？

事实上，我们仅需将现有FACSCanto II上的方案转移至DxFLEX即可继续使用。我想这可能也同样适用于Navios 的panel设计，性能表现卓越，设门更简单。

为了扩展panel设计，可采取以下3种策略：

1. 替换现有panel中的抗体
2. 在现有panel中增加其他抗体
3. 确定BC panel（或Duraclone干粉试剂）并添加其他抗体。

APD系统长期运行（如6个月左右）的数据重现性和性能稳定性如何？

基于我们的使用经验，我们认为CytoFLEX*（DxFLEX基于CytoFLEX平台打造）长期运行性能稳定。

DxFLEX支持体积计数功能吗？

CytExpert for DxFLEX软件支持体积计数功能选项，但未经验证，目前不可用于诊断。 

DxFLEX软件是否符合21 CFR第11部分合规性要求？

Carsten Lange博士：目前CytExpert for DxFLEX软件尚未满足21 CFR第11部分的要求。鉴于该条款要求主要适用于生物制药环境，我们鼓励用户在此类应用中使用符合21 CFR第11部分要求的CytoFLEX软件。

Ulrich Sack简介
Ulrich Sack，教授/博士

德国莱比锡大学医学院临床免疫学研究所诊断实验室主任。先后于莱比锡大学获得医学博士学位、埃朗根马克斯·普朗克学会临床研究小组亚历山大·冯·洪堡学会奖学金，并取得临床免疫学学历。

自2002年以来一直担任德国莱比锡大学临床免疫学研究所教授。主要研究方向是实现最新免疫学研制成果的临床实验室转化。2008年至2015年，担任莱比锡大学再生医学转化中心（TRM）研究主任。2005年至2015年，担任弗劳恩霍夫细胞疗法和免疫学研究所团队领导兼顾问。现为多个临床免疫学和实验室诊断领域科学专家网成员。

作为技术评审员，参与德国、爱尔兰和阿拉伯国家ISO 15189、ISO 17025和ISO 17043认证推广。持续推动最新实验室方法的临床常规诊断成果转化。致力于细胞免疫学，专门研究免疫功能和流式细胞术。所作研究主要面向跨学科研究，以及免疫系统与肿瘤和慢性病疾病状况之间的相互作用。

在免疫诊断学、心理神经免疫学、炎性疾病、免疫肿瘤学等领域发表研究论文约300篇。2011年至2018年，一直担任IFCC流式细胞术工作组组长，致力于促进最新流式细胞术培训工作，在欧洲、亚洲和南美开设16门流式细胞术课程，涵盖基础科学、免疫学和血液学。过去十年间，所著《细胞诊断学》（与Attila Tarnok和Gregor Rothe合编）一书为临床流式细胞术标准奠定了坚实的基础。