工艺开发工作流程
细胞系开发是一项重大投资。新构建的细胞系或许能够有效合成目标产品，但新疗法的发现过程仍处于起步阶段。通常，商业生产开发过程涉及细胞生长培养基优化和稳定高产的补料策略、收获目标产品，同时分析产品以进行质量控制。该过程中的每一步骤均涉及反复试验和试错纠错循环。整个工作流程必须一致且可重复，同时确保尽可能提高产品产量。
培养基配方和补料策略优化
挑战：确定细胞系以及促进细胞生产的培养基和补料策略最佳组合。
适当的细胞营养对于提高细胞系稳定性和产品产量至关重要。从先前已开发的主细胞库（MCB）细胞系中提取细胞并接种至新培养基进行培养。此过程中，优化培养基参数非常重要，因为培养基组分的微小变化将会对间接成本、细胞活率和最终产品产量产生重大影响。
随着培养基和补料试验研究的逐步推进，性能表现不佳的细胞系将从主细胞库（MCB）中被去除。通过培养基试验可鉴别理想培养条件和最佳候选细胞系。然而这一工作流程通常需手动完成，且耗时耗力，在确定和发现理想的培养基组分和细胞系组合前，需经多轮手动数据录入和试错纠错环节。一旦细胞系建立，用于产品生产的菌种也需及时进行补料培养。随着细胞在培养基中的生长和代谢，还需对连续补料的培养物持续进行调控，因为，补料成分、补料时间间隔和补料数量均可改变目标产品的成分和产量。优化的补料参数能够：
- 持续保持细胞健康和生产力
- 确保培养过程中有毒代谢副产物缓慢堆积
- 确保目标产品按预期高水平稳定表达
细胞培养过程中，可采用贝克曼库尔特生命科学高通量微型生物反应器和细胞活率分析仪即时收集有用数据，实现繁杂手动工作流程的全面自动化。
收获和纯化/回收
挑战：开发快速、有效和高产量的纯化步骤。
当培养物上清液中的目标产物达到适当浓度时，即可回收培养物。首先，对培养物进行离心和过滤，以去除细胞杂质和细胞碎片。然后在色谱柱上进一步纯化上清液以捕获蛋白质A，去除病毒颗粒并将目标产物与其他杂质分离。色谱柱纯化的范围和柱长可能各有不同；例如，与亲和色谱柱结合的mAb在洗脱前可能需多次使用缓冲液进行精致（polishing）处理。
分析开发
挑战：确保产品一致性的同时扩大生产规模。
在生产过程中，准确分析目标产品可大幅节省时间并确保产品特异性。将理想细胞生长培养基与理想细胞系匹配后，即可进行大规模细胞培养。然而，在大规模培养过程中，细胞系可能存在不稳定性，可能出现基因突变、生物合成基因簇缺失或目标产品成分和质量改变。
例如，采用qPCR（实时荧光定量）分析可确保目标产品培养规模扩大的同时，细胞基因拷贝数保持一致。引入自动化技术，可在细胞活率检测中快速表征mAb产品的质量和功能。贝克曼库尔特助您开发分析方法以深入研究您的细胞系，确保一致的生产过程质量控制，简化技术成果转化流程。
总结
- 培养基和补料策略必须针对新细胞系进行优化。采用自动化工作流可通过并行实验加速完成这一步骤。
- 产品回收至关重要，但通常耗时耗力。贝克曼库尔特可根据您的需求为您提供特定产品的高效解决方案。
- 培养物生长过程中同步进行分析，将帮助您全面了解生产过程。贝克曼库尔特助您为特定产物精心选择或设计专门解决方案。
上述产品和方法不适用于诊断过程。
