对液体颗粒检测的洁净室要求

在注射药物制剂或输注药物制剂中的污染颗粒或微生物，可导致感染、过敏反应或在极端情况下过敏性休克。因为患者安全受到威胁，药品生产质量管理规范 (GMP) 指南要求注射液和输注液在受控环境中生产，以遏制任何因大气颗粒物而导致的产品污染的风险。

在成品中检测颗粒含量时，存在相同风险。USP <787> 建议在受控环境下进行颗粒计数检测，以减少样品在测试过程中的污染风险，并防止虚报 “假阳性” 的结果，如果在测试阶段有颗粒掺入到药品中，就有可能发生虚报假阳性。在测试期间确保样品不受污染是至关重要的，这可以避免一次代价高昂的虚报污染事件，甚至可能会阻碍整批产品放行。关于 USP <787> 光阻法的更多内容。

对颗粒进行分类

总体来看，任何半固态至固态物质在识别出来时都应被计数，并应视为危险。实例包括空气、液体、凝胶、单个固体、聚合体、结块、药物固体、盐、多晶型物、润滑剂和增塑剂。

颗粒物的常见类型是外在型、内在型和固有型。

USP <787> 允许存在不溶性蛋白质颗粒作为蛋白质药物制剂的固有部分，将它们标记为 “固有” 颗粒。该标准明确区分了固有的蛋白质颗粒和不应存在的 “污染物” 颗粒。为了确保成品符合允许的颗粒限制要求，必需要了解颗粒的识别、源头和特征。

USP <787> 要求生产厂家对 ≥ 10 μm 和 ≥ 25 μm 的颗粒进行计数检测。固有的蛋白质粒度通常在亚微米或纳米范围内，因此通过这些检测是无法测出的。然而，随时间推移，蛋白质倾向于 “折叠” 或聚合形成大到足以影响通过/失败结果的颗粒。蛋白质聚合是不理想和不希望发生的，因为其导致该蛋白质有治疗效果的部分被封闭，使其对于患者的疗效降低。

对蛋白质配方的样品制备

  • 在该物质上抽轻度真空，以消除夹带的气体
    • 在使用蛋白质时，避免超声
  • 在任何时候都不建议倒置混合产品
    • 轻轻重新混合；用手缓慢旋动容器
  • 必须仔细进行稀释，以避免解离和/或聚合
    • 必须使用适量特定溶液进行复原
    • 应检测溶剂本身，以确保它不是颗粒的来源。注：不允许从总计数中减去稀释剂计数

USP < 787 > 和光阻法系统的准备

使用光阻法计数器时，应先使用微粒检查用水以确保系统工作正常。建议在轮班、操作员更换或其它界定的间期进行这些健康检查。

  • 空白检测液 1 （“无颗粒”微粒检查用水）
  • 检测物质的系统适用性
    • 颗粒计数参考标准液或 USP PCRS （已知含量的特定大小的物质）
    • 或合适的替代品

测试和样品体积

USP <787> 还陈述了注射液的体积，其一般比小分子药品的体积要小。USP <788> 每批样品体积要求 ( 25.0 毫升) 对于蛋白质的药物制剂来说这是具有挑战性和非常昂贵，因蛋白质药物制剂生产成本高且通常生产规模较小的。根据 <787>，如果可以提供足够证据，而且在统计学上可以代表检测的样本制造的批次，那么允许制造商使用 0.2L 至 5.0mL 进行检测。

总颗粒含量︰ 限定在 6,000 个颗粒以内

粒度阈值︰与 <788> 的限值相似，含 10 μm 及 10 μm 以上的微粒数不得过 6,000 粒，含 25 μm 及 25 μm 以上的微粒数不得过 600 粒（所有剂型）

USP <787> 建议定期监测低于 10 μm 的群体，以描述成品制剂的稳定性特征。

USP <787> 鼓励蛋白质药物制剂的制造商使用光阻法颗粒计数器和正交技术2来进行颗粒检测，以更好地揭示随时间推移的生物制品的结构与稳定性。虽然这是主技术，但并非所有制剂都可用光阻法检测显微镜下可见颗粒。

2可以使用正交法来评价/验证主方法。示例：可以采用两种方法来调查蛋白质聚合物 —— 方法 1：:尺寸排阻色谱/正交方法 2︰ 分析性超速离心法。

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