分析型超速离心概述

分析型超速离心(AUC)用于溶液中大分子表征 

分析型超速离心(AUC) 是可用于确定蛋白质或其他大分子的分子量、流体动力学和热力学特性的最通用、最严格、最精确的技术。

虽然它的历史可以追溯到近一个世纪,但 AUC 是:

  • 在不需要标准的无基质环境中执行的独立、第一原则技术。
  • 在提供相同范围的信息方面是其他技术所无法超越的,拥有可比拟的精确度和准确性。
  • 是溶液中蛋白质分子量测定的黄金标准方法2

AUC 101:基于速度和平衡提供洞见

与用于分析大分子的其他方法不同,分析型超速离心(AUC)能够在生物相关溶液条件下对样品在天然状态下进行表征。AUC 可用于研究几乎任何类型的分子或颗粒,其所接受的浓度范围广泛,溶剂种类多样。对于许多研究问题,目前不存在其它理想的分析方法代替 AUC。1

AUC 为研究人员提供了两种互补的实验方法。沉降速率提供有关分子大小和形状的第一原理流体动力学信息。沉降平衡提供有关溶液摩尔质量、化学计量比、结合解离常数和溶液非理想性的相同类型信息。

更多问题?更多答案。

在一个实验中,AUC 技术可以为重要问题提供比任何其他同类技术更多的答案:

  • 形状:我的蛋白质是什么样的形状?
  • 直径:我的颗粒大小是多少?
  • 质量:我的蛋白质或溶液中的复合物的分子量是多少?
  • 化学测量:有多少亚基构成我的蛋白质?
  • 纯度:我的样品中还有其他颗粒吗?
  • 制剂:我的蛋白质在这个缓冲液中性质怎么样?
  • 异质性:我的蛋白质是否与其他分子结合,复合物的构成是什么?
  • 聚合:我的蛋白质仍然处于可用的状态吗?我应该期望我的药物配方有免疫反应吗?
  • 结合:我的蛋白质是否与其他蛋白质结合或游离?
  • 构象:我的蛋白质与配体结合后,其构象会改变吗?

请在我们的分析型超速离心简介手册中了解有关 AUC 的更多内容。

参考文献

1 Cole JL, Lary JW, Moody T, et al. Analytical Ultracentrifugation: Sedimentation Velocity and Sedimentation Equilibrium. Methods Cell Biol 2008;84:143–79.

2 Berkowitz S, Philo J. Characterizing Biopharmaceuticals using Analytical Ultracentrifugation. In: Houde D, Berkowitz S, editors. Biophysical Characterization of Proteins in Developing Biopharmaceuticals. Amsterdam: Elsevier; 2015. p. 211-260.

 

 

Content and Resources

Analytical Ultracentrifuge (AUC) Consumables Guide Learn about options available to you to make the most informed choice and maximize your use of the AUC.
DGE-AUC: Adapting the Power of Density Gradient Separations for Gene Therapy Analytics Learn more about how density gradient ultracentrifugation (DGUC) has been adapted for analytical purposes supporting gene therapy by using an analytical ultracentrifuge (AUC), such as the Optima AUC.

何为分析型超速离心机?

Optima AUC

分析型超速离心机与高速预置离心机类似,只不过被旋转的样本中的颗粒通过一个完整的光学检测系统监控。这些光学系统(UV-Vis 吸光和瑞利干涉)能够准确观察分子在进行沉淀时的解决方案行为。使用先进的软件,数据可用于对所研究样品中的分子进行全面分析。

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