RNAdvance Blood 快速提取试剂盒性能和数据
从 RNA 采血管中提取 RNA
RNAdvance Blood快速提取试剂盒是基于 SPRI 顺磁珠技术的核糖核酸 （RNA） 提取试剂盒。它能够从使用 PAXgene 管采集的血液中进行高质量的RNA提取纯化。可以使用 2 mL 管或 96 孔板手动操作，或在贝克曼库尔特 Biomek 液体处理工作站进行 96 孔板自动化操作。使用 RNAdvance Blood快速提取试剂盒从 PAXgene 保存的血液中提取总 RNA，无 gDNA 残留和其他 PCR 抑制剂。
- 与基于 PCR 的下游检测兼容
- 生产高质量的 RNA
- 高效移除基因组 DNA 和其他污染物
稳定的样本 RNA 提取完整性
同一捐赠者同一天采集的三个不同的样品。所有样本在抽血后 6 小时内进行制备，在提取 RNA 之前，血液保存在冰上或 4°C 环境中。RIN 分数平均为 9.4，9 个样本的标准偏差为 0.4。使用生物分析仪 6000 RNA Nano Assay（Agilent） 评估 RIN 分数。
相较其他供应商竞争产品，RNAdvance Blood快速提取试剂盒提取更高产量 RNA
在图 3（下图）中，使用 NanoDrop（Thermo Fisher ）对样本进行定量。RNAdvance Blood 快速提取试剂盒分离的 RNA 比供应商 B 和 C 同类竞争试剂盒多两倍。在图 4（下图）中，使用 NanoDrop（Thermo Fisher）评估样品的纯度。Error bar 表示三个重复的标准偏差。RNAdvance Blood 快速提取试剂盒提取 RNA，适用于下游应用。
RNAdvance 试剂盒提供稳定的性能
在图 5（下图）中，在 24 小时内，从 2 个不同用户的 6 个捐赠样品中提取 RNA。样品使用 NanoDrop（Thermo Fisher）进行定量。两位用户提取的 RNA 总量相似。Error bar 表示三个重复的标准偏差。
RNAdvance 试剂无 DNA 和 PCR 抑制剂残留
通过 qPCR 评估扩增 DNA 的能力。采用引物（正向引物 5’-ggacttcgagatag-3’ 和反向引物 5’-agcactgttgcgtacag-3’）扩增 (β)-actin 基因（ActB）的第 4 个和第 5 个外显子，产生 327bp 扩增子。在图6（下图）中，无 RT 控制还表明了无干扰下游 RNA 应用的 DNA 残留。在图7（下图）中，使用 RNAdvance Blood 试剂盒提取的 RNA 可扩增，表明该试剂盒去除了 PCR 抑制剂。
RNAdvance 试剂盒从 PAXgene 管中采集的长达 4 天的血液中提取出高质 RNA
从捐赠 4 天内 6 个捐赠样品中提取RNA。血液采集在 PaxGene RNA 管中，储存在 4°C 环境中。在图 8（下图）中，从 400 μL 的血液中提取的 RNA 产量维持在 1 μg。第 2 天至第 4 天的捐献样品RNA 提取差异比在第 1 天的 RNA 提取差异更大。在图 9（下图）中，提取的 RNA纯度在 4 天内没有显著变化，且可用于下游应用。Error bar 表示三个重复的标准偏差。
工作流程视图
- 将 PAXgene 管中收集的血液在裂解缓冲液和蛋白酶 K 中裂解
- 将 RNA 与磁珠结合
- 将磁珠与杂质分离
- 用洗涤缓冲液和 70% 乙醇清洗磁珠，去除杂质
- 使用 DNase I 处理样品
- 使用 Bind 2 缓冲液将 RNA 与磁珠重新结合
- 用 70% 乙醇清洗磁珠，去除杂质
- 从磁珠中洗脱 RNA
- 转移到新的孔板
与柱提法的试剂盒相比，使用 Genomics RNAdvance 血液试剂盒可用更少的移液器操作从样品中提取 RNA
图 10（上图）表示使用 RNAdvance Blood 试剂盒或柱提法的试剂盒提取 1 至 96 个样本的 RNA 的总时间。即使是从 15 个样本中提取血液中的 RNA，采用 RNAdvance Blood 试剂盒进行操作的总耗时依旧更短。 在图 11（上图）中，完成 1、8、24、48 和 96 个样本所必需移液器操作的总次数，包括加样、混样和丢弃吸头。与柱提法试剂盒相比，使用多通道移液器大大减少了需要执行的移液器操作。
根据批次大小或整体实验通量的手动操作或自动化方法应用
使用 RNAdvance Blood 试剂盒进行 8、24、48 和 96 个样本的 RNA 提取所需的预估动手时间和总时间（以小时计数）。这些方法可以手动操作，也可以在液体处理工作站上自动执行。此表中表示的数据基于 Biomek i7 Hybrid 基因组工作站。体现手动和自动化之间的耗时差异（NR指“不推荐”）。
| RNAdvance Blood | Manual | Automated | ||
|---|---|---|---|---|
| Batch Size | 8 | Hands-on-Time | 1.00 | 0.25 |
| Total Time | 1.50 | 2.50 | ||
| 24 | Hands-on-Time | 1.50 | 0.25 | |
| Total Time | 2.00 | 2.50 | ||
| 48 | Hands-on-Time | NR | 0.25 | |
| Total Time | NR | 2.50 | ||
| 96 | Hands-on-Time | NR | 0.25 | |
| Total Time | NR | 3.00 | ||
RNAdvance Blood 试剂盒用于从血液中提取 RNA
RNAdvance Blood 试剂盒根据您的实验通量需求提供三种规格。点击下方任意一个产品货号进行购买或询价。想要了解更多信息，请浏览我们关于 RNAdvance 试剂盒用于从血液中提取 RNA 的相关网页。
| PART # | NAME | PREPS |
|---|---|---|
| A35603 | RNAdvance Blood Kit | 50 |
| A35605 | RNAdvance Blood Kit | 96 |
| A35604 | RNAdvance Blood Kit | 384 |
* 未用于或验证用于疾病或其他条件的诊断。
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